奶及奶粉中阿維菌素類(lèi)藥物殘留量測定的整體解決方案— GB 31659.4-2022

阿維菌素類(lèi)藥物是由阿維鏈霉菌產(chǎn)生的一類(lèi)廣譜高效獸用抗寄生蟲(chóng)藥，包括阿維菌素、伊維菌素、多拉菌素和乙酰氨基阿維菌素等。阿維菌素類(lèi)藥物可對動(dòng)物體外如疥螨、蜱蟲(chóng)、跳蚤、線(xiàn)蟲(chóng)等寄生蟲(chóng)進(jìn)行防治，降低寄生蟲(chóng)感染帶來(lái)的負面影響。但隨著(zhù)科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，發(fā)現阿維菌素類(lèi)藥物對多種生物類(lèi)群均有毒副作用。根據GB 31650-2019要求，規定了阿維菌素不得在泌乳期使用，在牛奶中伊維菌素、多黏菌素和乙酰氨基阿維菌素三種藥物的殘留限_量要求依次為不高于10 μg/kg、15 μg/kg、20 μg/kg。

安譜實(shí)驗參照《GB 31659.4-2022 奶及奶粉中阿維菌素類(lèi)藥物殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》，采用CNWBOND HC-C18 SPE固相萃取柱凈化，對牛奶、奶粉兩種基質(zhì)中阿維菌素類(lèi)藥物殘留量進(jìn)行測定，方法回收率高，精密度好。

一、樣品前處理

樣品提取

稱(chēng)取牛奶2 g（準確至±0.05 g）或奶粉0.5 g（準確至±0.01 g）于50 mL 離心管中，加乙腈8 mL，渦旋后200 r/min 水平振蕩5 min，8000 r/min離心8 min，轉移上清液至另一50 mL離心管中，加水10 mL、三乙胺25 μL，混勻，備用。

SPE小柱操作：

固相萃取小柱：CNWBOND HC-C18 SPE，貨號SBEQ-CA0854 ，規格500 mg/6 mL；

活化：5 mL乙腈；

平衡：5 mL 淋洗溶液（30%乙腈水溶液，含0.02%三乙胺）；

上樣：全部備用液，速度每秒1滴；

淋洗：5 mL淋洗液，抽干，5 mL異辛烷淋洗，抽干；

洗脫：5 mL乙腈洗脫，洗脫后抽干；

濃縮：收集洗脫液，50℃水浴氮氣吹干，殘余物中加50%乙腈水溶液1.0 mL，渦旋1 min充分溶解，濾膜（有機相尼龍針式濾器，SCAA-104）過(guò)濾后供液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜測定。

基質(zhì)匹配標準曲線(xiàn)

精密量取阿維菌素類(lèi)藥物標準工作液適量，用50%乙腈水溶液稀釋阿維菌素、伊維菌素、多拉菌素和乙酰氨基阿維菌素濃度分別為0.5 ng/mL、1 ng/mL、2 ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL，50ng/mL、100ng/mL和400ng/mL的系列標準工作液。各取標準工作液1.0 mL，分別加入空白試料經(jīng)提取、凈化和吹干后的殘余物中，充分溶解，作為基質(zhì)匹配標準溶液，過(guò)微孔濾膜（有機相尼龍針式濾器，SCAA-104）后上機測定。以特征離子質(zhì)量色譜峰面積為縱坐標、基質(zhì)匹配標準溶液濃度為橫坐標，繪制標準曲線(xiàn)。

二、儀器條件

2.1 液相色譜：

a) Athena C18-WP 液相色譜柱（2.1 mm*50 mm，1.8 μm，貨號：LAEQ-2105UA）；

b）柱溫：30℃

c）流速：0.40 mL/min

d）進(jìn)樣量：10 µL；

f）流動(dòng)相：A：含0.1%甲酸的乙腈溶液，B：含0.1%甲酸的水溶液；

表2-1 液相色譜梯度洗脫條件

2.2 質(zhì)譜條件：

a) 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀；

b) 離子源：電噴霧離子源（ESI)；

c) 檢測方式：多反應監測（MRM)；

d) 掃描方式：正離子模式；

e) 離子源溫度：500℃；

f) 噴霧電壓：5500 V；

表2-2 待測目標化合物定性、定量離子對及電壓參考條件

三、實(shí)驗譜圖

四、實(shí)驗數據

五、實(shí)驗結論

外標法處理數據，牛奶和奶粉兩種基質(zhì)中阿維菌素類(lèi)藥物的標準曲線(xiàn)線(xiàn)性方程均線(xiàn)性良好，R2 > 0.995。在高、低水平下加標回收率均在70%—120%范圍內，滿(mǎn)足國標實(shí)驗要求。

六、產(chǎn)品推薦