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柱層析填料主要包括的三種模式及操作的一些建議

更新時(shí)間:2021-07-14      點(diǎn)擊次數:1797
   柱層析填料是一種設計用于在病毒純化的捕獲和中度純化階段使用的層析填料。高載量與高流速和低反壓的結合降低了工藝周期時(shí)間并提高了產(chǎn)量。Capto家族系列由專(zhuān)門(mén)設計用于快速、有效和節約成本的純化的現代化工藝層析填料組成,符合現代大規模生物制藥和疫苗生產(chǎn)工藝的迫切需要。
 
  柱層析填料主要包括常壓分離、減壓分離和加壓分離3種模式。常壓分離是簡(jiǎn)單的分離模式方便、簡(jiǎn)單,但是洗脫時(shí)間長(cháng)。減壓分離盡管能節省填料的使用量,但是由于大量的空氣通過(guò)填料會(huì )使溶劑揮發(fā),并且有時(shí)在柱子外面會(huì )有水汽凝結,以及有些易分解的化合物也難以得到,而且還必須同時(shí)使用水泵或真空泵抽氣。加壓分離可以加快淋洗劑的流動(dòng)速度,縮短樣品的洗脫時(shí)間,是一種比較好的方法,與常壓柱類(lèi)似,只不過(guò)外加壓力使淋洗液更快洗脫。壓力的提供可以是壓縮空氣,雙連球或者小氣泵等。
 
  柱層析填料操作的一些建議:
  1、使用前首先明確自己的分離目的,即要做哪一方面的分離,從而選擇合適的凝膠填料,尤其對于沒(méi)有成熟工藝的學(xué)生和研發(fā)人員,請大家務(wù)必查閱文獻或者詢(xún)問(wèn)老師,同時(shí)根據自己的分離要求,選擇合適長(cháng)度和直徑的層析柱;  
 
  2、選擇好層析柱和填料以后,嚴格按照填料的要求來(lái)操作,包括填料的溶脹、脫氣、裝柱,期間務(wù)必嚴格按照說(shuō)明書(shū)操作;
 
  3、適當控制上樣量,上樣以前務(wù)必要過(guò)0.22µm濾膜;
 
  4、選擇合適的流動(dòng)相,根據膠的性質(zhì)決定能否用泵加壓;
 
  7、使用完畢后,請將層析柱做好處理,將層析柱堵好,以防干膠或者進(jìn)氣泡,同時(shí)請做好試驗紀錄,以便下一位同學(xué)用時(shí)方便查詢(xún)使用情況;
 
  8、試驗過(guò)程中所有用水或者溶液必須經(jīng)過(guò)抽濾和脫氣,嚴防氣泡;
 
  9、若在使用過(guò)程中發(fā)生意外情況。
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