嘔吐毒素親和柱的測定的基礎是抗原抗體反應,脫氧雪腐鐮刀菌烯醇單克隆抗體連接在柱內凝膠上,樣品中的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇經(jīng)過(guò)提取、過(guò)濾、稀釋?zhuān)缓髮悠诽崛∫壕徛耐ㄟ^(guò)脫氧雪腐鐮刀菌烯醇親和層析柱,在親和柱內,脫氧雪腐鐮刀菌烯醇與抗體結合,之后洗滌親和柱除去沒(méi)有被結合的其他物質(zhì)。用甲醇洗脫脫氧雪腐鐮刀菌烯醇,然后注入到分析儀器中用于檢測。
嘔吐毒素親和柱的原理:
測定的基礎是抗原、抗體反應,抗體連接在柱體內,樣品經(jīng)過(guò)提取、過(guò)濾后,緩慢的通過(guò)脫氧雪腐鐮刀菌烯醇親和柱,在親和柱內毒素與抗體結合,之后洗滌親和柱除去沒(méi)有被結合的其他無(wú)關(guān)物質(zhì)。用甲醇洗脫脫氧雪腐鐮刀菌烯醇,經(jīng)氮氣吹干復溶后注入到分析儀器中用于檢測。
嘔吐毒素親和柱的使用要點(diǎn):
1、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇對人體有害,應戴手套操作。
2、使用過(guò)的玻璃容器及脫氧雪腐鐮刀菌烯醇溶液好用5%濃度的次氯酸鈉溶液浸泡過(guò)夜。
3、不要使用過(guò)了有效日期的親和柱。
4、親和柱不使用時(shí)要2-8℃保存,不可凍存。
5、使用前,親和柱需回至室溫(22-25℃)。
6、取樣量:根據實(shí)際情況可以適當增減,但不可太少,同時(shí)提取液體積要按比例隨之改變。
7、pH:上柱液pH要在6~8之間,若偏離此范圍需用鹽酸或氫氧化鈉調節pH。