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硅膠基質(zhì)液相色譜柱流動(dòng)相的配制

更新時(shí)間:2019-05-19      點(diǎn)擊次數:1216
硅膠基質(zhì)液相色譜柱在使用前,進(jìn)行柱的性能測試,并將結果保存起來(lái),作為今后評價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測試時(shí)要按照色譜柱出廠(chǎng)報告中的條件進(jìn)行,只有這樣,測得的結果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。

硅膠基質(zhì)液相色譜柱流動(dòng)相的配制
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達到分離的目的,因此要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn):
a、流動(dòng)相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會(huì )沉淀在柱中(或長(cháng)時(shí)間保留在柱中)。
 
b、流動(dòng)相與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應。
 
c、流動(dòng)相的黏度要盡量小,以便得到好的分離效果;降低柱壓降,延長(cháng)泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動(dòng)相的黏度)。
 
d、流動(dòng)相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器,使用對紫外吸收較低的溶劑配制。
 
e、流動(dòng)相沸點(diǎn)不要太低,否則容易產(chǎn)生氣泡,導致實(shí)驗無(wú)法進(jìn)行。
 
f、在流動(dòng)相配制好后,一定要進(jìn)行脫氣。除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體既有利于檢測,還可以防止流動(dòng)相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。
 
硅膠基質(zhì)液相色譜柱可以由基質(zhì)直接構成,如硅膠、氧化鋁、高交聯(lián)度的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等等;也可以在這些基質(zhì)的基礎上涂布或化學(xué)鍵合固定液來(lái)構成。
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