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HPLC色譜純溶劑與檢測器的匹配和儲存注意事項

更新時(shí)間:2018-03-26      點(diǎn)擊次數:2478
HPLC色譜純溶劑與檢測器的匹配
在使用紫外可見(jiàn)光檢測器時(shí),需選用無(wú)紫外吸收特性的溶劑作流動(dòng)相。樣品測定波長(cháng)應當在溶劑紫外吸收波長(cháng)上限以上,噪聲降至10-4~10-U,才能保證檢測的靈敏度,才能用于梯度洗脫。流動(dòng)相溶劑在整個(gè)梯度范圍內互溶性要好,盡量減少溶劑折光指數對溶劑組成梯度的影響。
HPLC色譜純溶劑折光指數的改變會(huì )導致紫外吸收度的變化,使紫外檢測器產(chǎn)生噪音和漂移。因此,當使用兩種或兩種以上溶劑做梯度時(shí),其折光指數應該盡量接近,盡量減少溶劑紫外吸收度改變的影響。
在使用示差折光檢測器時(shí),應使流動(dòng)相的折光指數與被測樣品的折光指數有盡可能大的差別,因為二者的折射率差別越大,檢測器的響應信號越大,檢測靈敏度越高。示差折光檢測器一般不用于梯度洗脫,這是因為隨溶劑組成的改變,流動(dòng)相的折光指數也在改變,無(wú)法使基線(xiàn)穩定。
使用熒光檢測器時(shí),不能使用可熄滅、抑制或吸收熒光的溶劑作流動(dòng)相。溶劑的極性和溶液的溫度對熒光強度有明顯的影響。增大溶劑的極性,導致熒光增強。通常熒光物質(zhì)溶液的熒光效率和熒光強隨著(zhù)溫度的升高而降低。此外,當樣品濃度較高時(shí),易引起熒光猝滅效應和內濾效應,溶液濃度越大,該效應越顯著(zhù),溶液中的其它成分,特別是順磁性物質(zhì)的存在,將使猝滅效應加劇。因此,在進(jìn)行熒光檢測時(shí),試樣要配成低于10-6g/mL濃度的溶液,要使用不含熒光物質(zhì)的溶劑。

HPLC色譜純溶劑儲存注意事項:
儲存于陰涼、通風(fēng)的庫房。遠離火種、熱源。庫溫不超過(guò)30℃,相對濕度不超過(guò)85%。保持容器密封。應與氧化劑、堿類(lèi)、活性金屬粉末分開(kāi)存放,切忌混儲。配備相應品種和數量的消防器材。儲區應備有泄漏應急處理設備和合適的收容材料。
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